荆防散干预一氧化氮合酶-一氧化氮通路的抗炎机制实验研究

目的 观察荆防散干预炎症模型动物一氧化氮合酶-一氧化氮(NOS/NO)通路的抗炎机制,为其功效和临床应用提供药理学依据.方法 采用角叉菜胶诱导大鼠胸膜炎模型和卵白蛋白致小鼠哮喘模型,测定大鼠胸腔渗出液与小鼠肺组织匀浆中NOS,iNOS活力和NO含量的变化.结果 荆防散各剂量组能不同程度地降低小鼠肺组织匀浆与大鼠胸腔渗出液中NOS、iNOS活力,并减少NO含量,其中以5 g·kg-1剂量作用显著.结论 荆防散能通过抑制NOS活力,尤其是与炎症反应密切相关的iNOS活力,从而减少炎症介质NO的生成来发挥抗炎作用,提示干预NOS/NO通路是其抗炎作用机制之一.     

柠檬总提取物对正常大鼠及SHR血压、血脂影响的实验研究

目的:研究安岳柠檬总提取物对正常及自发性高血压大鼠(SHR)血压、血脂水平的影响.方法:柠檬总提取物6.0 g·kg-1、3.6g·kg-1、2.16 g·kg-1连续灌胃给药21 d,颈动脉插管法观察对正常大鼠血压的影响,测定血清葡萄糖(GLU)、甘油三酯(TG)、血清总胆固醇(TC)含量;连续灌胃给药28 d,分别于给药7、14、21、28 d无创法测定SHR的血压,测定给药28 d后血清GLU、TG、TC含量.结果:柠檬总提取物6.0 g·kg-1对正常麻醉大鼠具有降血压作用,但对SHR血压无显著影响;各剂量组对正常大鼠、SHR血清TG含量有显著降低作用.结论:柠檬总提取物具有明确的降低TG含量作用,改善血脂代谢;其降血压作用的发挥可能与给药途径有关,有待进一步验证.     

吴茱萸及其主要成分的遗传毒性研究

目的:研究吴茱萸及其主要成分吴茱萸碱、吴茱萸次碱和柠檬苦素的遗传毒性,为有毒中药吴茱萸的开发利用提供依据。方法:选用了Ames试验、体外CHL细胞染色体畸变试验和小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验。Ames试验选用TA97、TA98、TA100、TA102、TA1535组氨酸缺陷型菌株。吴茱萸碱、吴茱萸次碱和柠檬苦素分别设5个剂量组:0.000 5、0.005、0.05、0.5、5mg/皿;体外CHL细胞染色体畸变试验,吴茱萸碱、吴茱萸次碱和柠檬苦素的剂量分别为0.005 mg/mL、0.05/mL和0.5 mg/mL,受试药物与CHL细胞接触时间分别为4 h和24 h;吴茱萸醇提物小鼠骨髓微核试验,设吴茱萸醇提物0.88、3.52、10.55 g(生药)/kg 3个给药剂量组。连续给药4 d,每天给药1次。结果:吴茱萸碱、吴茱萸次碱和柠檬苦素各剂量组Ames试验结果为阴性。CHL试验中,吴茱萸碱的试验结果为阴性;吴茱萸次碱24 h组细胞染色体畸变率略有增加,差异有统计学意义(P0.05);柠檬苦素4 h和24 h组细胞染色体畸变率都略有增加,0.05 mg/mL、0.5 mg/mL组与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P0.05),而0.005 mg/mL组与阴性对照比较,差异无统计学意义(P0.05)。微核试验中,吴茱萸醇提物的小鼠骨髓细胞微核试验结果为阴性。结论:综合以上3个试验结果,认为在本实验室条件下,吴茱萸醇提物无遗传毒性。但在体外试验中,吴茱萸次碱和柠檬苦素有致突变性。为进一步确认吴茱萸及其主要成分的遗传毒性,可进一步研究和探讨。     

当归饮子加减方对气血两虚模型小鼠迟发型超敏反应的影响北大核心CSCD

目的探讨当归饮子对气血两虚型小鼠迟发型超敏变态反应的影响。方法 SPF级KM小鼠48只,其中40只采用利血平及乙酰苯肼制作动物气血两虚模型,随机分为模型组、氯雷他定组、当归饮子高剂量组、当归饮子中剂量组、当归饮子低剂量组,每组8只;另取8只相同标准小鼠作空白组。当归饮子高、中、低剂量组给予小鼠60、30、15 g/kg当归饮子加减方提取浓缩液灌胃,氯雷他定组给予1.66 mg/kg氯雷他定生理盐水溶液灌胃,模型组和空白组小鼠给予等体积生理盐水灌胃。每日1次,连续给药1周。除空白组外,每只小鼠腹部用1%DNCB溶液均匀涂抹进行致敏,致敏后第5天,将1%DNCB溶液均匀涂抹于小鼠右耳进行攻击,空白组同样涂耳但未致敏,攻击后24 h,测定每组小鼠耳廓肿胀度及抑制率。各组实验动物眼眶取血,采用双抗夹心ELISA法测试血清中Ig E水平。结果与空白组比较,模型组耳肿胀度明显增加,Ig E水平升高(P<0.01);与模型组比较,氯雷他定组及当归饮子3个剂量组耳肿胀度降低,Ig E水平降低(P<0.05,P<0.01),同时当归饮子高、中剂量组耳肿胀度降低优于氯雷他定组(P<0.05)。用药各组耳廓肿胀度抑制率从高至低依次为:当归饮子高剂量组67.3%,当归饮子中剂量组56.0%,当归饮子低剂量组48.1%,氯雷他定组47.3%。结论当归饮子方能抑制小鼠耳廓肿胀反应,降低血清中Ig E水平,对气血两虚证小鼠迟发型超敏反应有一定抑制作用。     

miRNA通过Mcl-1基因调控HBV阳性肝癌细胞对索拉菲尼的敏感性

目的： 探讨干预 HBV 阳性肝癌细胞相关 miRNAs 对肝癌细胞索拉菲尼敏感性的影响。 方法： qPCR 检测 HepG2.2.15 （HBV阳性）和HepG2.vc （HBV阴性）肝癌细胞中miR-29、miR-101和miR-193b的表达,以HepG2.2.15细胞中低表达 的miRNA合成相应的miRNA mimics,并将目标miRNA mimics分别转染至HepG2.2.15和HepG2.vc细胞;qPCR检测两种细胞中 目标miRNA表达,Western blotting检测目标miRNA mimics转染前后Mcl-1蛋白表达。同时分别向转染和非转染的HepG2.2.15 和HepG2.vc细胞中分别加入（1×10 -9 ）~（1×10 -3 ）mol/L的索拉菲尼,72 h后测定索加菲尼对细胞作用的IC 50 值和细胞凋亡率。 结 果： 与HepG2.vc细胞比较,HepG2.2.15细胞中miR-193b的表达显著降低（P<0.05）;与miR-193b mimics转染前比较,HepG2.2.15 和HepG2.vc细胞中miR-193b的表达均有显著升高（P<0.05）。与HepG2.vc细胞比较,HepG2.2.15细胞中Mcl-1蛋白表达显著增 高（P<0.05）;miR-193b mimics转染后,HepG2.2.15和HepG2.vc细胞中Mcl-1蛋白表达较两者转染前均有显著降低（P<0.05）; miR-193b mimics 转染后,索拉菲尼可显著增加两组细胞的凋亡率（P<0.01）,同时其对两组细胞作用的 IC 50 值显著降低 [HepG2.2.15细胞： （0.215±0.028）vs (0.391±0.025) mol/L,HepG2.vc细胞： （0.315±0.027）vs (0.654±0.019) mol/L;均P<0.01]。 结 论： HBV相关肝癌细胞中miR-193b的低表达可能是癌细胞对索拉菲尼敏感性降低的原因,Mcl-1可能为miR-193b的靶点,miR- 193b mimics与索拉菲尼具有显著协同作用。     

黄芪多糖治疗免疫性肝损伤作用机理研究

目的 研究黄芪多糖对肝损伤的保护作用,初步探讨其作用机制,为开发其新的临床适应证提供药理学依据.方法 雄性昆明种小鼠40只随机分为正常对照组、模型组、黄芪多糖组、阳性组,各组小鼠以相同给药体积灌胃给予药物或纯净水,每天1次,连续7d.末次给药后1h,对照组尾静脉注射生理盐水,其余各组尾静脉注射LPS+D-GlaN,造模后禁食不禁水16h后断颈处死小鼠.剖取肝脏,分别测定肝脏组织INOS、NO和ICAM-1含量,观察比较肝脏组织病理形态,以及肝脏组织P65蛋白免疫组织化学表达.结果 与模型组比较,给药组小鼠肝脏组织INOS、NO及ICAM-1含量均有极显著减少(P＜0.01)；显微镜下肝脏细胞嗜酸性变性、坏死,出血等病变显著降低(P＜0.05),肝脏组织P65蛋白荧光OD值极显著减小(P＜0.01).结论 黄芪多糖对小鼠免疫性肝损伤具有显著保护作用,其作用机制可能与降低肝脏组织P65蛋白的合成,减少细胞INOS、NO、ICAM-1的形成有关.     

吴茱萸对CHL细胞染色体畸变影响的研究

目的 探讨吴茱萸的主要生物碱(吴茱萸碱和吴茱萸次碱)以及柠檬苦素对CHL细胞染色体畸变的影响,对其遗传毒性进行初步研究.方法 用不同剂量的吴茱萸碱、吴茱萸次碱、柠檬苦素对CHL细胞进行体外染毒,观察其致CHL细胞染色体结构及数量的变化.结果 吴茱萸在0.5 mg/ml、0.05 mg/ml和0.005 mg/ml不同测试浓度下,在+S9和-S9条件下,与细胞作用4h及24h收集细胞进行染色体畸变分析,各剂量组染色体畸变率均在正常范围；吴茱萸次碱在0.5 mg/ml、0.05 mg/ml和0.005 mg/ml不同测试浓度下,在+S9和-S9条件下,与细胞作用4h收集细胞进行染色体畸变分析,各剂量组染色体畸变率均在正常范围,与细胞作用24 h,可诱发可重复性的阳性结果；柠檬苦素在2.5mg/ml、0.25 mg/ml和0.025 mg/ml不同测试浓度下,在+S9和-S9条件下,各剂量组染色体畸变率均出现可重复性的阳性结果.结论 在本试验所确定的测试条件下,吴茱萸次碱和柠檬苦素可导致CHL细胞染色体畸变.     

窄谱中波紫外线联合他克莫司对白癜风模型表皮中黑色素表达的影响

目的：探讨窄谱中波紫外线（ NB－UVB）联合外用他克莫司对白癜风豚鼠模型给药前后组织病理中黑色素数量的变化。方法构建白癜风动物模型,按体重随机分成6组,每组8只,正常组、模型组、对照组（白斑区,外用凡士林,2次／天,连用2个月）、单用药物组（白斑区,外用0．03％他克莫司,2次／天,连用2个月）;单用光照组（白斑区,单用NB－UVB照射,隔日1次,连续2个月）;联合组（外用他克莫司联合NB－UVB照射,给药频次、方法及时间同单用药物组及单用光照组）。2个月后,通过组织病理学检查,比较给药前后豚鼠表皮组织中黑色素数量的差异。结果与模型组比较,联合组的表皮中黑色素的表达明显增多（ P＜0．01）。结论联合应用NB－UVB与他克莫司软膏治疗白癜风效果显著。     

一例患腹泻症藏酋猴继发感染病例病理学观察

目的 为探明患腹泻症藏酋猴继发感染病例的致病机理.方法 对一例曾有反复腹泻病史的8岁龄藏酋猴进行病理学研究.结果 临床症状上,该猴处于严重脱水状态;大体解剖上,该猴的肺部和小肠均出现严重眼观病变;组织病理学上,该猴的肝脏、肾脏组织均出现颗粒变性和空泡变性,多组织器官性的血管发生淤血、充血,管壁间质发生水肿;胰腺、膀胱和脑部组织均未见异常组织病变.结论 猕猴的腹泻具有病因复杂和季节性发生的特点,治疗应坚持中草药治疗为主,西药治疗为辅的原则.